人们很早就发现,
肿瘤组织内及其周围存在着大量T/NK细胞。与机体其他部位相比,肿瘤及其周围组织中的T/NK细胞功能显著降低。当今,常以T/NK细胞为效应细胞,以IL-2为刺激剂作为肿瘤的过继性免疫治疗的手段,但对大部分病人疗效不佳,其原因是肿瘤及其周围组织内也存在大量富含单核/巨噬细胞的单个核细胞 (Mo)。 Mo 对荷瘤动物淋巴细胞抗肿瘤作用有抑制效应,这种抑制作用与Mo分泌反应性氧代谢物(reactive oxygen metabolites,ROM)密切相关。二氢氯化物组胺(简称组胺)可以逆转ROM对T/NK抗肿瘤活性抑制作用,并且已做II期临床试验,效果明显,但其毒副作用大,临床难于应用。为了寻求高效低毒、便于临床应用的ROM逆转剂,我们进行了
还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)在体外
白血病细胞株培养体系中逆转ROM、增强NK细胞杀伤K562细胞的实验研究,现将结果报道如下。
本研究探讨还原型谷胱甘肽(GSH)逆转反应性氧代谢物(ROM)对NK细胞抗白血病效应的抑制作用。
在K562细胞、NK细胞的混合培养体系中分别加入富含单核细胞的单个核细胞(Mo)和白细胞介素-2(IL-2),观察ROM产量和K562细胞抑制率,然后分别加入GSH或二氢氯化物组胺(组胺),观察ROM产量及K562细胞抑制率的变化。
结果表明:加入IL-2后,ROM的产量从33.17±25.02 U/L增至223.59±59.41 U/L(P〈0.01),K562细胞抑制率从65.56%升至85.89% (P〈0.01);在加入E/Mo=10/1、10/5、10/10 3种浓度的Mo后,ROM产量分别为389.79±43.83 U/L,456.74±42.77 U/L,601.42±21.92 U/L,K562细胞抑制率分别为82.36%,81.36%,48.09%,加入组胺或GSH后,E/Mo=10/2时,ROM产量从389.79±43.83 U/L,分别减至50.21±22.4 U/L和-3.58±9.49 U/L(P〈0.05),随着GSH或组胺浓度的增加ROM产量逐减少,K562细胞抑制率从82.53%分别升至94.64%和96.39(P〈0.05),ROM产量与K562细胞抑制呈负相关(P〈0.05);E/Mo=10/5或10/10时,高浓度的GSH或组胺可使ROM产量减少,但K562细胞抑制率提高不明显(P〉0.05)。
结论: 当E/Mo=10/2时,GSH逆转ROM强于组胺,提高NK细胞对K562的抑制率与组胺相似,但毒副作用轻微,GSH可能成为更理想的抗白血病的免疫佐剂。
近年来研究发现,肿瘤/白血病细胞内GSH/GST-S活性增高使肿瘤/白血病细胞产生多药耐药性[10,11],细胞内的GSH增多,降低了化疗效果。GSH是肿瘤/白血病多源耐药的机制之一,我们得出了与文献报道相反的结果的原因是:文献报道GSH影响肿瘤/白血病疗效指的是化疗疗效,因为许多化疗药物进入细胞内主要通过产生ROM而发挥作用,在ROM作用下线粒体还原型巯基转化为氧化型二硫键,使线粒体通透性转换孔(mtPTP)开放,并进一步诱导细胞凋亡[12]。因此,肿瘤/白血病细胞内GSH增多,化疗药效降低;而在过继性免疫治疗中,GSH在肿瘤/白血病细胞外起到逆转Mo产生的ROM,保护T/NK细胞免受ROM的损伤,充分发挥T/NK细胞的抗肿瘤作用。
综上所述,GSH具有逆转ROM,提高NK对肿瘤/白血病细胞的抑制活性,毒副作用轻微,可能成为继组胺之后更理想抗肿瘤/白血病免疫佐剂,值得进一步研究。